7.2.5. Определение прозоленности голья

Прозоленность голья определяют методом ферментативно-термического воздействия по продолжительности растворения срезов голья. Для испытания всех видов голья после золения вырезают пробы размером 3х5 см из огузочной части. Пробы для анализа отбирают из 3 шт. голья в партии.

Из отобранной пробы вырезают кусочки размером 10х6 мм и приготавливают микросрезы толщиной 30 мкм по 3 шт. из каждой пробы.

Для анализа отбирают срезы из сетчатого слоя; срезы из сосочкового слоя дермы и подкожной клетчатки не анализируют. Подготовленные срезы переносят в стеклянный стаканчик с 15 мл ферментной вытяжки.

Для получения вытяжки 0,15 г панкреатина настаивают в 15 мл дистиллированной воды при температуре 37°С в течение 30 мин, фильтруют и добавляют 1,5 мл 5 %-ного раствора хлорида натрия.

Стаканчик со срезами и вытяжкой помещают в водяную баню, предварительно нагретую точно до 55°С, и наблюдают за растворением срезов. Для установления продолжительности растворения срезов фиксируют время начала и окончания определения.

На протяжении всего процесса необходимо абсолютно точно поддерживать температуру на уровне 55°С. Это легко достигается применением ультратермостата или водяной бани большой вместимости (около 10 л).

Для удобства проведения анализа стеклянный стаканчик со срезами помещают в жестяной стаканчик, который подвешивают на круглой стеклянной или металлической палочке и погружают в водяную баню.

Для наблюдения за процессом растворения срезов стаканчик время от времени снимают с водяной бани: сначала через 15 мин после подвешивания стаканчика, а затем через каждые 5 мин.

Вначале срезы распадаются на мелкие частицы, которые в свою очередь распадаются на пучки волокон. Эти последние под влиянием ферментативно-термического воздействия утоняются, превращаются как бы в порошкообразную массу. Вскоре вытяжка становится прозрачной (конец анализа).

При определении прозоленности голья возможны случаи, когда после растворения основной массы коллагеновых срезов остаются тонкие полоски, не переходящие в раствор. Это происходит по следующей причине: во время нарезания срезов на микротоме нож вследствие неровности образцов, например из-за недостаточно равномерного замораживания, может прихватить часть сосочкового слоя или подкожной клетчатки. Анализ в таком случае необходимо повторить.

В тех случаях, когда возникают сомнения, не являются ли указанные волоконца не перешедшим в раствор коллагеном, поступают следующим образом. Замечают продолжительность растворения основной массы коллагеновых срезов и оставшиеся волоконца подвергают дальнейшему термическому воздействию; если в течение 10 мин они не растворяются, то за продолжительность растворения принимают время от начала анализа до растворения основной массы коллагеновых срезов, если же волоконца растворяются, то фиксируется соответствующая продолжительность растворения.