При мягчении панкреатином и поджелудочной железой пробу мягчильной жидкости отбирают из аппарата спустя 5 мин после добавления мягчителя и последующего вращения. В два стаканчика наливают по 20 мл профильтрованной мягчильной жидкости и добавляют по 40 мл 5%-ного щелочного раствора казеина при температуре 37 - 38°С.
Один стаканчик (опытный) помещают в термостат при температуре 37 - 38°С на 1 ч. Содержимое второго стаканчика (контрольного) осаждают добавлением точно 20 мл 0,2 н. раствора соляной кислоты и 10 мл 15%-ного раствора сульфата натрия Na2SО4. Выпавший осадок отфильтровывают. Через 1 ч таким же способом осаждают казеин в опытном стаканчике.
В 50 мл фильтратов, взятых из обоих стаканчиков, оттитровывают кислоту 0,1 н. раствором гидроксида натрия с 5 каплями индикатора (0,5%-ного раствора крезолового красного или 1%-ного спиртового раствора ???-нафтолфталеина). Разница между количествами гидроксида натрия, израсходованными на титрование (в расчете на 10 мл) фильтрата из обоих стаканчиков, выраженная в миллилитрах 0,1 н. раствора гидроксида натрия, характеризует активность мягчильной жидкости:
А = (а2 - a1) k/5,
где а2 и а1 - объем 0,1 н. раствора гидроксида натрия, израсходованный на титрование соответственно опытной и контрольной проб (50 мл), мл; k - поправочный коэффициент к титру 0,1 н. раствора гидроксида натрия.
5%-ный раствор казеина приготавливают по методике, изложенной выше.